近年来,肠癌的发病率不断攀升,并呈现出年轻化的趋势。这一情况促使科学家们寻找新的研究方向,尤其是类器官技术的应用,为理解肠癌的发病机制及开发有效的治疗靶点带来了新的希望。
在培养人肠癌类器官的过程中,必须引入多种生长因子和信号通路调节因子,以模拟肿瘤微环境,并支持类器官的长期培养。在初期培养阶段,Wnt信号通路激活因子如Wnt-3a和R-spondin-1是关键因素,它们有助于维持干细胞的增殖和类器官的形成。此外,BMP信号通路的抑制因子Noggin能够抑制BMP信号,从而维持干细胞的未分化状态。表皮生长因子EGF则促进上皮细胞的增殖,而Rho激酶抑制剂Y-27632主要用于抑制细胞凋亡,从而促进干细胞的存活,通常在初次培养时加入。
在二维持和扩增阶段,同样需要添加Wnt信号通路激活因子R-spondin-1和Wnt-3a,以及抑制因子Noggin,并继续使用EGF以维持细胞的增殖。同时,引入TGF-β信号通路抑制剂,如A83-01,以防止细胞的过度分化。其他小分子抑制剂,例如
p38MAPK激酶抑制剂SB-202190,可以显著提高类器官的形成效率和稳定性。
在肿瘤特异性培养阶段,BMP信号通路的抑制因子Gremlin-1被证明能显著促进肠癌类器官的生长。同时,IL-6在肿瘤微环境中的显著增高可能进一步促进肠癌类器官的生长。
进入优化和特殊应用阶段时,Notch信号通路激活因子Jagged-1能够维持类器官的增殖。其他生长因子,如HGF和FGF10,可根据具体实验需求进行添加。
对于人肠癌类器官的培养,以经典的WNER组合(Wnt-3a、Noggin、EGF和R-spondin-1)为基础,同时结合肿瘤微环境中的特异性因子(如Gremlin-1和IL-6),能更好地模拟肠癌的生长环境。值得一提的是,新葡萄8883官网AMG不仅提供上述人肠癌类器官培养所需的细胞因子,还推出了现成的人肠癌类器官培养基套装3DCultrIntestinalCancerOrganoidGrowthMedium(Human),其使用便捷,操作简单,有助于推动您在科研领域的进展。