本试剂盒仅限于科学研究用途,不得用于医学诊断。人白三烯D4 (LTD4) ELISA试剂盒使用说明书包含如下内容:
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)。操作步骤如下:将样本、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入事先包被了adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育并彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色。在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,随后在酸性条件下转化为最终的黄色。颜色的深浅程度与样品中的adropin(AD)含量呈正相关。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以此计算样本的浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激。收集血液后,进行3000转离心10分钟,以迅速小心地分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂。进行3000转离心30分钟,提取上清液。
3. 细胞上清液:进行3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,之后进行3000转离心10分钟以提取上清液。
5. 保存: 若收集的样本未能及时检测,应按一次性用量分装,并冷冻保存于-20℃,避免反复冻融。在室温下解冻时,应确保样品均匀充分解冻。
注意事项
操作时需注意使用自备的物品,并且按要求进行操作。请参考试剂盒的组成。
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂准备及洗板方法
20×洗涤缓冲液的稀释比例为1:20,即1份20×洗涤缓冲液需加入19份蒸馏水。
结果判断及标准曲线绘制
请在Excel工作表中,将标准品浓度作为横坐标,相应的OD值作为纵坐标,绘制标准品线性回归曲线。根据曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明:本产品由新葡萄8883官网AMG生产,特此说明。